César Milstein wurde am 8. Oktober 1927 in Bahia Blanca, Argentinien, geboren. Nach dem Studium der Chemie an der Universität von Buenos Aires promovierte er 1957 bei dem Biochemiker Professor Stoppani an der Medizinischen Hochschule der Universität Buenos Aires im Fach Chemie auf dem Gebiet der enzymatischen Kinetik von Aldehyd-Dehydrogenase. Neben einer Forschungstätigkeit am Instituto Nacional de Microbiologia in Buenos Aires (1957-1963), dessen Leiter er zwischen 1961 und 1963 war, arbeitete er als Postdoktorand am Department of Biochemistry der Universität Cambridge, England, bei Professor Malcom Dixon auf dem Gebiet der Metall-Aktivierung des Enzyms Phosphoglucomutase. Er schloss seine Forschungen dort erneut mit einer Doktorarbeit ab. Während dieser Zeit begann auch eine fruchtbare Zusammenarbeit mit dem zweifachen Chemie-Nobelpreisträger Professor Frederick Sanger (ebenfalls Universität Cambridge). Ab 1963 waren Milstein und Sanger Mitglieder des wissenschaftlichen Kollegiums des damals neu gegründeten Medical Research Council Laboratory of Molecular Biology in Cambridge. Milstein wurde 1983 Leiter der Abteilung Protein- und Nukleinsäurechemie in Cambridge^[2-4].

Hybridom-Technik zur Herstellung monoklonaler Antikörper

Mit entscheidend für Milsteins große wissenschaftliche Karriere war der Vorschlag Sangers, Milsteins Forschungsgebiet von der Enzymology auf die Immunologie zu verlagern^[2]. Bekannt wurde Milstein auch durch seine Arbeiten auf dem Gebiet der Strukturanalyse von Antikörpern sowie den Mechanismen, die für die Diversität dieser Immunglobuline ursächlich sind. Diesbezüglich entwickelte er mit seinem Postdoktoranden Georges Köhler 1975 die sogenannte Hybridom-Technik, die erstmalig durch Fusion von Myelomzellen (Krebszellen) mit B-Lymphozyten (antikörperproduzierende Zellen) die Produktion monoklonaler Antikörper in großen Mengen mit maßgeschneiderter Spezifität ermöglichte. Aus dieser Zeit resultieren auch verschiedene Patente bzw. Patentanmeldungen zu diesem Forschungsgebiet (beispielsweise US 4 350 683 A , (1,01 MB) US 4 472 500 A , (1,75 MB) WO 91/05 260 A1 und DE 0 589 915 T1 ).

Das Prinzip dieser Technik beruht darauf, dass Antikörper produzierende B-Zellen, die eine limitierte Lebensdauer haben, mit Krebszellen (Myelomzellen), die nicht dem programmierten Zelltod (Apoptose) unterliegen, fusioniert werden, sodass gleichsam unsterbliche Hybride (Hybridomzellen) entstehen.

Diese Hybridomzellen können monoklonale Antikörper produzieren ( US 4 350 683 A und (1,01 MB) US 4 472 500 A ^[6-7]). Figur 1 erläutert die einzelnen Schritte der Hybridom-Technik zur Herstellung von monoklonalen Antikörpern nach Milstein und Köhler im Detail: Immunisierung einer Maus (1), Isolation von B-Zellen aus der Milz (2), Kultivierung von Myelomzellen (3), Fusionierung von B- und Myelomzelle (4), Selektion und Screening optimaler Zelllinien (5), Weiterverarbeitung bzw. Lagerung der Myelomzellen (6), Antikörperherstellung in vitro (7a) oder in vivo (7b), Ernte der produzierten Antikörper (8) aus US 4 350 683 A und (1,01 MB) US 4 472 500 A ^[5-8].

Die durch diese Technik bedingte einfache Verfügbarkeit monoklonaler Antikörper eröffnete neue Möglichkeiten in der Grundlagen- und in der angewandten biomedizinischen Forschung. Dadurch wird beispielsweise eine genauere Identifizierung der verschiedenen Funktionen unterschiedlicher Abschnitte von Antigen-Molekülen, eine hohe Aufreinigung von pharmazeutischen Wirkstoffen oder eine bessere diagnostische Charakterisierung von Krankheiten und deren Behandlung möglich ( (1,23 MB) WO 89/ 03 993 A1 , (1,52 MB) WO 00/55 183 A1 und (8,74 MB) WO 03/07 5016 A1 ).

Patentdokumente zu César Milstein

Publikationsnummer	Jahr	Titel
US 4 350 683 A	1980	Antibody production from hybrid cell line
US 4 472 500 A	1981	Rat myeloma cell lines
WO 89/ 03 993 A1	1987	Paired helical filament core and antibody thereto useful in diagnosing Alzheimer's disease
WO 91/05 260 A1	1989	A method for the identification and selection of antibody producing cells
DE 0 589 915 T1	1991	Herstellung von monoklonalen Antikörpern
WO 00/55 183 A1	1999	Method for refolding molecules for polypeptides containing ig domains
WO 03/07 5016 A1	2002	SCD Fingerprints

Quellen:

^[1] http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Milstein_lnp_restauraci%C3%B3n.jpg?uselang=de [recherchiert am 29.05.2012]

^[2] "César Milstein - Autobiography". Nobelprize.org. 21.08.2012 http://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1984/milstein.html [recherchiert am 21.08.2012]

^[3] SPRINGER, T. A.: César Milstein, the father of modern immunology. In: Nature Immonology, Vol. 3, No. 6, 501-503 (2002)

^[4] "Frederick Sanger - Biography". Nobelprize.org. 21.08.2012 http://www.nobelprize.org/nobel_prizes/chemistry/laureates/1958/sanger-bio.html [recherchiert am 21.08.2012]

^[5] http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/0/09/Hybridomtechnik.png , Autor der Grafik ist Martin Brändli [recherchiert am 29.05.2012]

^[6] "César Milstein - Nobel Lecture: From the Structure of Antibodies to the Diversification of the Immune Response". Nobelprize.org. 21.08.2012 http://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1984/milstein-lecture.html [recherchiert am 21.08.2012]

^[7] "Physiology or Medicine 1984 - Press Release". Nobelprize.org. 21.08.2012 http://www.nobelprize.org/nobel_prizes/medicine/laureates/1984/press.html [recherchiert am 21.08.2012]

^[8] http://de.wikipedia.org/wiki/Hybridom-Technik [recherchiert am 29.05.2012]

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